醫學與健康科學

登革熱是由埃及斑蚊傳播的疾病。近年其分布範圍不斷擴大，造成數百萬人死亡。病媒蚊控制對於防止疾病傳播至關重要，但目前尚無安全有效的疫苗以及治療藥物，過量倚賴殺蟲劑又造成病媒蚊抗藥性與環境問題，因此開發新型替代方案是當務之急。 本研究完成了一種 RNAi 新型殺蟲劑。以埃及斑蚊體內的 ADAM12d 作為標靶，由 qRT-PCR 評估，採用 RNAi 干擾的方式進行研究。經基因選殖後透過細菌載體，大量複製出 dsRNA，投放至埃及斑蚊二齡幼蟲的生活水域，抑制ADAM12d 表現。 結果顯示此 RNAi 殺蟲劑在發育過程使幼蟲出現蛻皮異常、生長緩慢、死亡率增加，達到減少病媒蚊的繁殖與孳生。亦已著手於實作層面研究。本研究結果將有助於確定 ADAM12d 的生物功能，也成功以 ADAM12d 基因作為一種新型的生物防治法。此 RNAi 的方式不會連帶殺死其他蚊蟲，也是完全針對有害病媒蚊蟲的，符合現行生態需求，有望成為有效新型藥物。

我國慢性腎病人口約 14%，大多患者會因藥物或免疫疾病而走向腎纖維化。根據文獻， miR-17-92 會影響 T 細胞分化，分化的差異則會造成不同程度的腎纖維化。 本研究取不同基因型小鼠的 CD4+T 細胞做體外分化。結果顯示含 miR-17-92 基因較多的 T 細胞分化成 Th1 比例較高、Treg 比例較少，但對 Th17 無顯著影響。將小鼠腎纖維化模式處理的細胞進行 RT-qPCR 和染色實驗，觀察剔除 miR-17-92 基因的小鼠（簡稱 KO）腎纖維化的情形，發現造成腎纖維化的纖維蛋白、膠原蛋白和其 mRNA 的表現量均減少。將WT 和 KO 小鼠腎臟進行染色後，發現 WT 小鼠腎中 Th1 的數量較多，Treg 則較少。綜合實驗結果推論，miR-17-92 可以增加腎中 Th1、降低 Treg 的數量，而 Th1 則會加重腎纖維化的情形。期盼本研究能對腎纖維化疾病有所貢獻。

慢性腎衰竭的病人係腎功能在幾個月到數年期間逐漸而難以逆轉的衰退，其中腎臟纖維化在慢性腎臟病中的一個重要病理變化。此種現象主要是發生在腎臟的腎單位經由過濾或再吸收過程所造成。一旦腎臟損傷時腎絲球或空腔滲透發炎細胞活化，因而產生 ROS、纖維化訊息和發炎細胞激素等訊息。淋巴細胞質蛋白-1 (LCP-1) 是一種 F-肌動蛋白結合蛋白，與多種惡性腫瘤和非酒精性肝炎有相關性。但 LCP-1 在腎小管間質纖維化之功能性角色及分子機轉，至今仍然未知。本研究利用臨床慢性腎衰竭病人資料及細胞模式來釐清 LCP-1 是腎小管間質纖維化之生物指標蛋白及其調控腎小管間質纖維化之分子機制。

二甲雙胍(metformin)為第二型糖尿病的口服藥。現有研究已知粒線體在肝癌組織中有過度表現的情形，且二甲雙胍與粒線體自噬作用相關然其機制尚未清楚，故本研究探討二甲雙胍對於肝臟細胞粒線體自噬作用的活化機制以了解其是否具肝癌治療的潛力。以西方墨點法測試加入二甲雙胍前後人類肝癌細胞(Huh7)的 LC3B-I、LC3B-II的表現，發現加藥後表現上升。以串聯螢光標記實驗，透過螢光顯微鏡觀察加藥前後粒線體的型態從線狀變為橄欖球狀，LC3表現上升，PARKIN有明顯位移至粒線體外膜的情形，顯示二甲雙胍可刺激自噬體的形成。並透過 mito-QC(mito-quality control)的技術，可觀察到加藥後粒線體與溶酶體結合的情形也有所提升。本研究推論二甲雙胍可活化人類肝癌細胞中 PINK1-PARKIN 依賴型選擇性粒線體自噬作用的形成，未來有望應用於肝臟疾病相關治療。