天狗現形劑-研發分辨四型登革病毒之抗原快篩試劑
登革熱(Dengue Fever)俗稱天狗熱,由登革病毒(Dengue virus; DENV)透過埃及斑蚊(Aedes aegypti)和白線斑蚊(Aedes albopictus)傳播並於熱帶及溫帶地區肆虐。每年全球約有五千萬至一億人感染登革病毒,約有五十萬人因登革出血熱(Dengue Hemorrhagic Fever; DHF)而住院。登革熱主要流行於熱帶及亞熱帶地區,尤其是與台灣頻繁往來的東南亞國家,其中一型與二型在東南亞國家病例數較高。當不同血清型登革病毒交錯感染容易引發登革出血熱以及登革休克症候群(Dengue Shock Syndrome),對公共衛生構成重大挑戰。因此研發可快速辨識四型登革病毒之檢驗試劑將有助於提升臨床診斷與後續治療。本報告的研究結果有三項,(1)四型登革病毒NS1 (Nonstructural Protein 1)蛋白的表達與純化:利用分子生物技術成功構建載體並純化四型NS1蛋白,作為免疫原蛋白用於小鼠免疫;(2)單株抗體的篩選與親和性測試:經三次免疫後,利用小鼠脾臟細胞與骨髓瘤細胞進行融合,篩選並生產針對NS1蛋白的單株抗體(monoclonal antibody, mAb),並通過酵素結合免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)驗證抗體的專一性及親和力;(3)快篩試劑的開發與性能測試:運用側向流體免疫層析法(lateral flow immunoassay)設計並組裝快篩試劑,先以重組蛋白進行初步測試,隨後將使用去活性病毒進行性能驗證,確保試劑的靈敏度與準確性。期望這些研究成果有助於台灣登革熱防疫且為臨床治療提供參考。