摘要或動機

非血基質鐵/α-酮戊二酸依賴型雙氧化酶為巨大酵素家族，其在生物體內進行許多重要反應。我們選用小巢狀麴菌之 AsqJ 蛋白，其與 Fe2+ 及 α-酮戊二酸能催化 cyclopeptin 的去飽和、環氧化，形成 cyclopenin。根據 AsqJ 蛋白結構，我們將與受質結合的 9 個胺基酸位置以不同鹼基對隨機取代，以轉譯不同胺基酸，構築酵素活性庫，送入大腸桿菌篩選並觀察 AsqJ 突變蛋白分解非典型受質之表現。 我們成功篩選出能分解 X-Gal 之 AsqJ 突變株，代表我們能以改變 AsqJ 特定位置胺基酸，進而改變其活性位點，並分解與原先截然不同的受質，故此篩選平台深具生化技術應用潛力。我們並進一步將上述突變株進行純化、晶體培養及結構解析，以釐清反應機制，並與奈米抗體結合以增強活性。目前正嘗試分解環境汙染物結構相似物，期望對環境做出貢獻。