摘要或動機

已知 liver receptor homolog-1(LRH-1)掌控著多種生理功能，在肝臟代謝中扮演著相當重要的角色，我們利用酵母菌雙雜交技術(Yeast two-hybrid)找出數種可能跟LRH-1產生交互作用的蛋白質，並從其中選擇v-maf avian musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog F (MafF)作為主要研究對象，探討其與LRH-1之間的作用對代謝造成的影響。本研究中，我們利用免疫沉澱法證實MafF可與LRH-1形成複合體，而MafF並不影響LRH-1蛋白的表現量。隨後以啟動子活性檢測MafF-LRH-1複合體在細胞內之功能，發現MafF能促進由LRH-1所調控的small heterodimer partner (SHP)、glucokinase IV (Gck)及side chain cleavage enzyme (SCC)等代謝相關啟動子之活性。此外我們以GST-pull down發現MafF與LRH-1結合區域位於LRH-1的DNA 鍵結位(DBD)。LRH-1則是僅與具有完整basic region (BR)以及leucine zipper (LZ) 兩個domain的MafF產生交互作用，單獨的BR以及LZ無法與LRH-1結合。另外，在肝臟細胞株HepG2中過度表現Myc-MafF，Western blot結果發現GCK有減少的趨勢，SHP則是有增加的現象，而LRH-1亦呈現增多的趨勢。Real-time PCR結果，比對Myc以及Myc-MafF，發現MafF存在時會使LRH-1以及GCK mRNA含量較控制組Myc有減少的趨勢，對SHP mRNA 則是沒有顯著影響。此外，我們在肝臟細胞株HepG2中加入胰島素，發現二者表現量皆有明顯的增加，說明胰島素刺激之下，MafF以及LRH-1蛋白質增加能夠增強肝臟能量代謝。