四膜蟲(Tetrahymena)進行有性生殖的特定階段中,有RNA interference調控DNA割除(DNA elimination)的核重組現象。 Drb3p 具有dsRNA結合區域,推測為一dsRNA結合蛋白,其表現時間和四膜蟲進行IES(internal excision sequence)的時期重疊,Drb3p 可能參與RNA interference的調控。 本實驗在DRB3前接上GFP序列,以觀察Drb3p在四膜蟲中的作用位置,再以RNA干擾術進行DRB3 基因沉默(knockdown)以了解Drb3p對四膜蟲核重組的影響。結果顯示,Drb3p主要出現在有性生殖時的新大核,也就是核重組RNA interference調控機制主要發生的位置,但由於基因沉默後仍有少量DRB3表現,我們尚未確定其對四膜蟲所造成的影響。於是我們改用基因剔除(knockout) DRB3,探討Drb3p的功用,然而就目前的實驗結果來說,Drb3p對子代的大核製造並沒有顯著的影響,但並不能排除Drb3p對子代數目與生理可能造成影響。 未來,我們希望能更進一步的使用免疫沈澱法等方式研究Drb3p所結合的RNA,以期對RNA interference領域有更深入的發現
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