L-多巴在酪氨酸酶的作用下,可以轉換成多巴醌,多巴醌繼而自發轉變為黑色素,在此實驗當中,利用帶有青枯病菌的酪胺酸酶基因片段pBAD-518458-bbr的大腸桿菌(E. coli DH5α)將L-多巴轉換成黑色素,然後將微生物去除,只保留黑色素,以避免之後的實驗受到細菌的干擾。 分別將四種金屬離子,Au3+、Cu2+、Co2+、Pd2+ 以1.0 mM的濃度加入黑色素中,使黑色素將金屬離子還原成金屬奈米粒子,形成含有黑色素與金屬奈米粒子的混合溶液。將黑色素去除,避免之後測吸收時受到干擾。再以冷凍乾燥機抽乾乾燥,去除水分以利保存。 將對-硝基苯胺與已乾燥的金屬依照一定濃度加入96孔盤中,再加入硼氫化鈉當作還原劑,也是提供氫陰離子的來源,將對-硝基苯胺還原成對-苯二胺,用Multi-Mode Microplate Reader (BioTeK)測每隔10秒波長385 nm的吸收,再將數據整理成反應速率常數。在四種金屬當中,奈米金的催化速率最佳,所以選擇金屬金以濃度0.1、0.5、1.0 mM作濃度的探討。
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